猴痘疫情再爆發(fā)，全式金生物高品質(zhì)核酸檢測(cè)原料助力檢測(cè)
猴痘新毒株爆發(fā)，再引關(guān)注
2024年8月14日，世界衛(wèi)生組織二度宣布猴痘疫情構(gòu)成“國(guó)際關(guān)注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件”。
8月15日，海關(guān)總署發(fā)布關(guān)于防止猴痘疫情傳入我國(guó)的公告，引發(fā)公眾關(guān)注。
這是自2022年7月以來(lái)第二次就猴痘疫情發(fā)出最高級(jí)別警報(bào)，引起國(guó)際社會(huì)高度關(guān)注。
猴痘病毒病原學(xué)
猴痘屬于痘病毒科、脊索病毒亞科、正痘病毒屬[1]。病毒顆粒較大（200-250 nm），痘病毒呈磚狀，周圍有脂蛋白包膜，內(nèi)含線性雙鏈DNA基因組[2-3]。目前，猴痘病毒有兩大分支，分別是剛果盆地（中非）分支和西非分支，本次非流行國(guó)家部分病例病毒測(cè)序結(jié)果為西非分支[4]。
猴痘病毒（見(jiàn)彩色透射電子顯微照片），來(lái)源：UK Health Security Agency/Science Photo Library
猴痘病毒的流行病學(xué)
猴痘是一種人畜共患病，1958年首次在圈養(yǎng)猴子身上發(fā)現(xiàn)因此被命名為猴痘病毒，現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明非洲嚙齒動(dòng)物是其天然宿主，曾引起過(guò)松鼠、大鼠、小鼠、猴子、土撥鼠和人的感染[4-5]。1970年從剛果民主共和國(guó)一名懷疑患有天花的兒童身上分離出來(lái)猴痘病毒，確診第一例人類病例[6]。自從猴痘病毒被發(fā)現(xiàn)后，非洲以外的地區(qū)也發(fā)生了人類感染猴痘病毒的散發(fā)性集群病例[7-12]。并在近期，已有多個(gè)國(guó)家報(bào)道發(fā)現(xiàn)猴痘確診病例。
· 2003年，從加納進(jìn)口的岡比亞巨鼠感染了土撥鼠進(jìn)而導(dǎo)致53例人類猴痘病例。
· 2018-2021年，共有5起發(fā)生在有尼日利亞旅居史的人感染猴痘病例的報(bào)道。
· 2022年5月26日，世衛(wèi)組織表示猴痘病毒已經(jīng)蔓延到20多個(gè)國(guó)家。
· 2024年8月14日，世界衛(wèi)生組織二度宣布猴痘疫情構(gòu)成“國(guó)際關(guān)注的突發(fā)公共衛(wèi)生事件”。
猴痘病毒傳播途徑和風(fēng)險(xiǎn)
猴痘病毒也可通過(guò)密切接觸了感染者或者感染動(dòng)物的呼吸道分泌物、皮膚或粘膜損傷、血液、體液或最近被病人體液或病變材料污染的物品而造成人際間傳播[13]。此外，猴痘病毒還可經(jīng)由母嬰傳播和性傳播。
猴痘病毒感染的臨床癥狀
猴痘病毒感染癥狀與天花相似，但臨床嚴(yán)重程度較輕，潛伏期通常為5至21天，以全身性的發(fā)熱、頭痛、肌肉酸痛或淋巴結(jié)腫大，皮膚性的丘疹、水皰或者膿皰，以及并發(fā)其他病原微生物感染等癥狀為主，持續(xù)時(shí)間為2-5周[14]。
猴痘病毒與天花病毒的異同
自從20世紀(jì)70年代一場(chǎng)與天花密切相關(guān)的病毒的根除運(yùn)動(dòng)結(jié)束以來(lái)，科學(xué)家們一直在關(guān)注猴痘，發(fā)現(xiàn)在天花根除后的每一年，對(duì)這些病毒免疫力減弱或沒(méi)有免疫力的人群都在增加。
猴痘與天花的相同點(diǎn)：
· 近親，同屬于正痘病毒屬。
· 抗原性、生物學(xué)特性、形態(tài)、結(jié)構(gòu)等方面十分相似。
· 典型癥狀臨床表現(xiàn)相似。
猴痘與天花的不同點(diǎn)：
· 感染對(duì)象不同：猴痘感染人類和動(dòng)物，天花僅能感染人類。
· 傳播方式不同：猴痘可發(fā)生動(dòng)物傳人、人傳人，天花只在人和人之間傳播。
· 致死率不同：猴痘致死率為1%-10%，天花致死率約30%。
· 潛伏期不同：猴痘的潛伏期為6-16天，也可能在5-21天，天花的潛伏期為7-17天。
· 猴痘人際間傳播效率遠(yuǎn)低于天花，癥狀明顯輕于天花。
猴痘病毒顆粒，來(lái)源：英國(guó)《新科學(xué)家》雜志網(wǎng)站 天花病毒顆粒，來(lái)源：中國(guó)《顯微鏡下的疾病與藥物》
嚴(yán)防輸入
盡管歐洲猴痘感染人數(shù)可能進(jìn)一步增加，但流行病學(xué)家認(rèn)為，歐洲猴痘疫情不太可能發(fā)展成全球流行病。而且，世衛(wèi)組織數(shù)據(jù)顯示，天花疫苗對(duì)猴痘病毒的有效性高達(dá)85%。目前，我國(guó)還從未報(bào)道過(guò)發(fā)現(xiàn)猴痘確診病例，也沒(méi)有在動(dòng)物宿主中發(fā)現(xiàn)該病毒，目前的重點(diǎn)是外防輸入。中國(guó)疾控中心病毒病預(yù)防控制所研究人員表示“猴痘和天花雖有諸多相似之處，但在臨床致病性及感染傳播特性方面，它們并不相同，猴痘成為天花那樣的烈性傳染病的可能性微乎其微”。
猴痘病毒檢測(cè)方法
猴痘感染可通過(guò)病毒分離培養(yǎng)技術(shù)，或通過(guò)PCR技術(shù)從猴痘患者皮損標(biāo)本中檢測(cè)出猴痘基因組DNA片段來(lái)確認(rèn)，也可通過(guò)電子顯微鏡觀察、正痘病毒抗原的免疫組織化學(xué)染色、抗正痘病毒IgM(表明最近接觸)和IgG(表明以前接觸或接種)的血清研究進(jìn)行檢測(cè)[15]。此外，如患者存在近期到流行地區(qū)的旅居史、接觸從流行地區(qū)進(jìn)口的野生動(dòng)物、接觸受感染的動(dòng)物或人，這些線索均有助于建立鑒別診斷。
目前，我國(guó)已建立起多種早期猴痘病毒檢測(cè)的技術(shù)，如qPCR技術(shù)，可在短時(shí)間內(nèi)對(duì)痘病毒做出早期篩查診斷，結(jié)合新一代測(cè)序方法可對(duì)猴痘病毒的來(lái)源與傳播鏈進(jìn)行分子溯源。
產(chǎn)品推薦
全式金作為國(guó)內(nèi)優(yōu)質(zhì)分子診斷原料供應(yīng)商，擁有18年分子生物學(xué)產(chǎn)品研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，深耕分子酶領(lǐng)域，可提供從病毒核酸提取到檢測(cè)所需的核心原料，助力猴痘病毒分子診斷產(chǎn)品的研發(fā)。
病毒核酸提取
柱提法 ：
EasyPure? Viral DNA/ RNA Kit (ER201)
磁珠法：
MagicPure? Simple Viral DNA/RNA Kit (EC311)
自動(dòng)化：
MagicPure? Simple 32 Viral DNA/RNA Kit (EC311-32)
MagicPure? Simple 96 Viral DNA/RNA Kit (EC311-96)
MagicPure? Fly 96 Viral DNA/RNA Kit (EC331-96)
自動(dòng)核酸提取儀：
· 觸屏操控，自由編程
· 自控系統(tǒng)，安全智能
· 精確控制，高效控溫
· 紫外消毒，杜絕污染
· 結(jié)果穩(wěn)定，高效提取
TS-32 自動(dòng)核酸提取儀 TS-96 自動(dòng)核酸提取儀
病毒核酸檢測(cè)
全式金推出的PerfectStart? II Probe qPCR SuperMix UDG在PCR體系中加入熒光探針，通過(guò)熒光量的檢測(cè)測(cè)定樣本核酸量，其組分中含有PerfectStart? Taq熱啟動(dòng)酶及特殊優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液，可更加高效、精準(zhǔn)完成qPCR檢測(cè)。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
· 3種抗體封閉，特異性高，靈敏度高，擴(kuò)增效率高；
· 特殊優(yōu)化的qPCR反應(yīng)緩沖液，可提供更高的靈敏度和特異性；
· 使用UDG酶和dUTP，有效防止PCR產(chǎn)物污染，數(shù)據(jù)準(zhǔn)確；
· 適用范圍廣，已成功用于非洲豬瘟病毒、偽狂犬病病毒、哈維氏弧菌、蝦肝腸胞蟲(chóng)和副溶血性弧菌等檢測(cè)；
· 穩(wěn)定性好，在反復(fù)凍融、預(yù)混液、常溫、37℃等條件下保存，均可穩(wěn)定擴(kuò)增。
· 提供可凍干版本。
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)：
多重PCR檢測(cè)
以牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）cDNA、豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）cDNA、非洲豬瘟病毒（ASFV）質(zhì)粒、偽狂犬病病毒（PRV）gDNA混合物為模板，進(jìn)行qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品可進(jìn)行4重檢測(cè)。
高靈敏度、高擴(kuò)增效率
分別以不同濃度豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）cDNA（10 pg、0.1 pg、0.01 pg）為模板，使用TransGen、Company V、Company T產(chǎn)品進(jìn)行qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品靈敏度可達(dá)0.1 pg，擴(kuò)增效果優(yōu)于Company V與Company T。
分別以不同濃度牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）cDNA（100 pg、1 pg、0.1 pg）為模板，使用TransGen、Company V、Company T產(chǎn)品進(jìn)行qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品靈敏度可達(dá)0.1 pg，擴(kuò)增效果優(yōu)于Company V與Company T。
適用范圍廣
TranGen產(chǎn)品可成功對(duì)不同濃度（107 copies/ml-104 copies/ml，10倍稀釋）的哈維氏弧菌、蝦肝腸胞蟲(chóng)和副溶血性弧菌DNA進(jìn)行檢測(cè)。
穩(wěn)定性好
批次穩(wěn)定性（單重）
使用不同批次的TransGen產(chǎn)品進(jìn)行單重qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品可保障穩(wěn)定的批次重復(fù)性。
批次穩(wěn)定性（四重）
使用不同批次的TransGen產(chǎn)品進(jìn)行四重qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，TransGen產(chǎn)品可保障穩(wěn)定的批次重復(fù)性。
凍融穩(wěn)定性（單重）
使用0、5、10、15、20次反復(fù)凍融保存處理后的TransGen產(chǎn)品進(jìn)行單重qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，反復(fù)凍融后TransGen產(chǎn)品性能不受影響，仍可穩(wěn)定擴(kuò)增。
凍融穩(wěn)定性（四重）
使用0、5、10、15、20次反復(fù)凍融保存處理后的TransGen產(chǎn)品進(jìn)行四重qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，反復(fù)凍融后TransGen產(chǎn)品性能不受影響，仍可穩(wěn)定擴(kuò)增。
預(yù)混穩(wěn)定性（單重）
將單重檢測(cè)基因的引物探針與TransGen產(chǎn)品進(jìn)行預(yù)混，并在不同溫度處理7天后進(jìn)行qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，TransGen預(yù)混液在不同溫度保存后仍可穩(wěn)定擴(kuò)增。
預(yù)混穩(wěn)定性（雙重）
將雙重檢測(cè)基因的引物探針與TransGen產(chǎn)品進(jìn)行預(yù)混，并在不同溫度保存7天后進(jìn)行qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，TransGen預(yù)混液在不同溫度保存后仍可穩(wěn)定擴(kuò)增。
預(yù)混穩(wěn)定性（三重）
將三重檢測(cè)基因的引物探針與TransGen產(chǎn)品進(jìn)行預(yù)混，并在不同溫度保存7天后進(jìn)行qPCR檢測(cè)。結(jié)果表明，TransGen預(yù)混液在不同溫度保存后仍可穩(wěn)定擴(kuò)增。
參考文獻(xiàn)
[1] Monkeypox. Marlyn Moore; Farah Zahra.Update May 22, 2022.
[2] Monkeypox Virus in Nigeria: Infection Biology, Epidemiology, and Evolution. Viruses. 2020.
[3] Genomic variability of monkeypox virus among humans, Democratic Republic of the Congo. Emerg Infect Dis. 2014.
[4] 猴痘診療指南.2022.
[5] Monkeypox. Wkly Epidemiol Rec. 2011.
[6] A human infection caused by monkeypox virus in Basankusu Territory, Democratic Republic of the Congo. Bull World Health Organ. 1972.
[7] Update: multistate outbreak of monkeypox--Illinois, Indiana, Kansas, Missouri, Ohio, and Wisconsin, 2003. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2003.
[8] Diagnosis of Imported Monkeypox, Israel, 2018. Emerg Infect Dis. 2019.
[9] Imported Monkeypox, Singapore. Emerg Infect Dis. 2020.
[10] Family cluster of three cases of monkeypox imported from Nigeria to the United Kingdom, May 2021. Euro Surveill. 2021.
[11] Monkeypox in a Traveler Returning from Nigeria - Dallas, Texas, July 2021. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 2022.
[12] Imported Monkeypox from International Traveler, Maryland, USA, 2021. Emerg Infect Dis. 2022.
[13] Modelling human-to-human transmission of monkeypox. Bull World Health Organ. 2020.
[14] Human Monkeypox: Epidemiologic and Clinical Characteristics, Diagnosis, and Prevention. Infect Dis Clin North Am. 2019.
[15] Human monkeypox. Clin Infect Dis. 2014.
