AQ7系列探針法qPCR全場景試劑家族,精準應答每一次檢測
實時熒光定量 PCR (Quantitative Real-time PCR) 是一種研究基因表達量的重要方法,利用熒光信號的變化實時監(jiān)測 PCR 擴增反應中每一個循環(huán)擴增產物量的變化,通過 Ct 值和標準曲線的關系對起始模板進行定量分析。目前 qPCR 檢測已被廣泛地應用于分子生物學研究的各個領域,如人類傳染病的診斷、動物病原體基因的檢測、畜禽產品的檢驗檢疫、生物制品的鑒定等。
qPCR 最常用的兩種檢測方法分別為 SYBR Green 染料法和熒光探針法。非特異的染料法成本較低,但會出現類似于普通 PCR 擴增產物干擾的假陽性情況。探針法利用熒光探針實現了熒光信號的累積與 PCR 產物形成完全同步,具有靈敏度高、特異性強及操作簡便等優(yōu)勢,在目前國內的臨床診斷中應用最為廣泛。
全式金生物深耕分子生物學領域 19 年,憑借在酶改造和產品開發(fā)方面的深厚積累與豐富經驗,持續(xù)為 IVD 企業(yè)、科學機構、第三方檢測機構提供高品質的、高性價比的解決方案。 產品已成功應用于基因表達分析、病原體檢測、基因分型、拷貝數變異分析等多個方面,助力客戶取得了一系列突破性成果。
基礎款
PerfectStart? II Probe qPCR SuperMix
探針法熒光定量預混試劑 II (AQ711)
PerfectStart? II Probe qPCR SuperMix UDG
探針法 qPCR 試劑盒含 UDG II (AQ712)
產品特點:
? 3 種抗體封閉,特異性高,靈敏度高,擴增效率高。
? 特殊優(yōu)化的 qPCR 反應緩沖液,可提供更高的靈敏度和特異性。
? 配有適用于不同機型的 Passive Reference Dye (調整 PCR 加樣誤差引起的管間差異),數據準確。
? 適用范圍廣,已成功用于非洲豬瘟病毒、偽狂犬病病毒、哈維氏弧菌、蝦肝腸胞蟲和副溶血性弧菌等檢測。
? 穩(wěn)定性好,在反復凍融、預混液、常溫、37℃ 等條件下保存,均可穩(wěn)定擴增。
? AQ712 使用 UDG 酶和 dUTP,有效防止 PCR 產物污染,數據準確。
應用場景:適用于動物、植物、微生物 DNA 的探針法熒光定量 PCR 檢測,不同物種兼容性較好。
實驗數據
高靈敏度、高擴增效率
分別以不同濃度藍耳病病毒 (PRRSV) cDNA (10 pg、0.1 pg、0.01 pg) 和牛病毒性腹瀉病毒 (BVDV) cDNA (100 pg、1 pg、0.1 pg) 為模板,使用 TransGen、Company V、Company T 產品進行擴增。結果表明,TransGen 產品靈敏度可達 0.1 pg,擴增效果優(yōu)于 Company V 與 Company T。
適用范圍廣泛
TransGen 產品可成功對不同濃度 (107 copies/ml-104 copies/ml,10 倍稀釋) 的哈維氏弧菌、蝦肝腸胞蟲和副溶血性弧菌 DNA 進行檢測。
PerfectStart? III Fast Probe qPCR SuperMix UDG
快速探針法 qPCR 試劑盒含 UDG III (AQ722)
產品特點
? 抗體封閉,特異性高,靈敏度高,擴增效率高,抗抑性強,適用物種范圍廣。
? 特殊優(yōu)化的 qPCR 反應緩沖液,可提供更高的靈敏度和特異性。
? 支持快速擴增程序:最快35分鐘即可完成檢測。
? 擴增能力強:適用于多重 PCR 擴增。
? 穩(wěn)定性好:反復凍融25次、37℃ 放置7天或室溫放置15天,擴增性能均無明顯變化。
? 使用 dUTP/UDG 防污染系統,有效防止 PCR 產物污染,數據準確。
? 支持引物、探針全預混。
? 搭配通用 ROX 染料 Universal Passive Reference Dye,校正孔間信號誤差。
應用場景:適用于復雜樣本的檢測,目前已成功應用于 HPV、HBV 及動物病原體檢測等。
實驗數據
擴增速度快
以梯度稀釋的非洲豬瘟病毒 (ASFV) gDNA為模板,使用 TransGen 產品進行快速 qPCR 檢測。結果表明,TransGen 產品具有超快速擴增能力,延伸時間僅需 1 s,35 min 即可完成整個擴增過程。
模板兼容性高
以偽狂犬病病毒 (PRV) (GC 69%) 的 gDNA 為模板,使用 TransGen、Company V 產品進行 qPCR 檢測,結果表明,TransGen產品對復雜模板的擴增能力更強。
PerfectStart? IV Fast Probe qPCR SuperMix UDG
探針法快速 qPCR 試劑盒含 UDG IV (AQ732)
產品特點:
? 特異性高:采用新一代高效抗體封閉的熱啟動 Taq DNA 聚合酶。
? 抗抑制能力強:可用于血液、組織研磨液、拭子等樣本的直擴測試。
? 可進行全預混:支持引物、探針全預混,37℃ 加壓 30 天,產品性能穩(wěn)定
? 支持快速擴增程序:45 個循環(huán)可在 35 min 分鐘完成,操作更省時。
? 穩(wěn)定性好:反復凍融 50 次、37℃ 保存30 天,產品性能不受影響。
? dUTP/UDG 防污染系統:有效防止 PCR 產物的交叉污染,數據準確。
應用場景:針對拭子、血液樣本及含有其它雜質的樣本表現優(yōu)異,目前已成功應用于非洲豬瘟 (提取效果不佳的樣本)、HPV、肺癌、呼吸道細菌等檢測項目。
實驗數據
抗抑制能力強
以非瘟陽性組織研磨液、健康豬血+ 非瘟 gDNA 作為模板,使用 TransGen、Company V 產品對非瘟國標基因進行 qPCR 檢測,結果表明,TransGen 產品的抗抑制能力更強。
直擴效果好
選取健康豬的口鼻拭子進行核酸釋放劑釋放后得到的樣本、核酸釋放劑及水作為樣本稀釋液,分別對非瘟 gDNA 進行等量核酸稀釋。使用 TransGen 產品進行四重 qPCR 檢測,結果表明,TransGen 產品可用于口鼻拭子的直擴檢測。
免提取qPCR
直擴 qPCR 是一種不經核酸提取而直接對樣本進行直接擴增的反應。全式金生物推出的免提取熒光定量快檢測產品采用高抗逆的酶和特殊配置的 buffer,可對裂解后的生物樣本進行免核酸提取擴增,并保證結果的準確性。此技術大大縮短檢測時間,節(jié)約了人力成本和實驗資源,提高了檢測效率。
PerfectStart? V Fast Direct Probe qPCR SuperMix UDG
免提取熒光定量快檢試劑盒 (AQ742)
產品特點:
? 操作簡單:無需核酸提取純化步驟,即可對靶標基因進行檢測。
? 抗抑制能力強:采用新一代 Taq DNA 聚合酶,對模板親和力和 qPCR 擴增性能顯著提升,對含有雜質的模板耐受度高。
? 快速擴增:支持快速擴增程序,35 min 內完成 PCR 反應。
? dUTP/UDG 防污染系統:有效防止 PCR 產物的交叉污染,數據準確。
應用場景:抗凝全血、血漿、血清、咽拭子等樣品的免提取擴增。
實驗數據
以加入不同濃度健康豬全血的非瘟陽性核酸為模板進行擴增,結果顯示,AQ742 在含有 0.5% 全血的條件下與不含血液的樣本性能幾乎一致,在含有 10% 的全血的條件下仍能有效檢出,抗抑制能力強,可進行血液樣本直擴。
疾病診斷
探針法 qPCR 檢測技術在病毒快速檢測中具有開發(fā)速度快、靈敏度高、特異性好等特點,適用于新發(fā)傳染病的快速篩查和診斷、對早期癥狀不明顯的病毒傳染病進行檢測以及對具有相似病癥的多種病毒感染的診斷等。多重核酸檢測技術具有可同時檢測多個靶標、高通量、低成本等優(yōu)勢,滿足大規(guī)模篩查、定量等檢測需求。全式金生物推出 HPV、HBV 及動物病原體檢測產品,可實現快速、多重、精準檢測。
PerfectStart? III Fast Probe qPCR SuperMix UDG (P)
快速探針法 qPCR 試劑盒含 UDG III (P) (AQ722-S1)
應用場景:適用于 HPV 病毒超多重檢測
實驗數據
使用 AQ722-S1 進行 HPV 病毒的多重測試,結果顯示,AQ722-S1 可成功進行 20 copies /反應的檢出,靈敏度高,特異性好。
PerfectStart? III Fast Probe qPCR SuperMix UDG (P)
快速探針法 qPCR 試劑盒含UDG III(P) (AQ722-S2)
應用場景:適用于 HBV 病毒檢測
實驗數據
使用 AQ722-S2 進行 HBV 病毒檢測,結果顯示,AQ722-S2 可成功進行 1 IU/反應的穩(wěn)定檢出,對健康人所提取的 gDNA 無檢出,靈敏度高,特異性好。
PerfectStart? IV Fast Probe qPCR SuperMix UDG (P)
快速探針法 qPCR 試劑盒含 UDG IV(P) (AQ732-S1)
一款適用于 HPV 病毒超多重檢測的探針法 qPCR 專用預混液,濃度為 2×,只需額外加入引物、探針及樣本,即可在單個反應孔中進行多重 PCR 反應。本產品采用的PerfectStart? IV Taq 熱啟動酶(經過基因改造的第四代 Taq DNA 聚合酶),顯著提升了模板親和力和 qPCR 擴增性能,提高對檢測樣本的靈敏度,除了滿足核酸提取的樣本擴增外,還可滿足宮頸刮片樣本裂解后免提取的擴增需求。此外,本產品引入了 dUTP/UDG 系統,室溫下即可發(fā)揮作用,能夠有效防止 PCR 產物殘留、氣溶膠污染導致的假陽性擴增。
應用場景:適用于 HPV 病毒拭子直擴樣本的超多重檢測。
PerfectStart? IV Fast Probe qPCR SuperMix UDG
快速探針法 qPCR 試劑盒含 UDG IV(P) (AQ732-S2)
一款適用于動物疫病病毒檢測的探針法 qPCR 專用預混液,濃度為 2×,只需額外加入引物、探針及樣本,即可在單個反應孔中進行單重、多重 PCR 反應。本產品采用的PerfectStart? IV Taq 熱啟動酶 (經過基因改造的第四代 Taq DNA 聚合酶),顯著提升了模板親和力和 qPCR 擴增性能,同時提高對含抑制物的樣本及低濃度樣本檢測的靈敏度。此外,本產品引入了 dUTP/UDG 系統,室溫下即可發(fā)揮作用,能夠有效防止 PCR 產物殘留、氣溶膠污染導致的假陽性擴增。
應用場景:適用于動物疫病檢測
基因分型
基因分型 (genotyping) 是確定種群中個體間遺傳變異的過程。SNPs (單核苷酸多態(tài)性) 或點突變是最常見的遺傳變異類型,是構成個體之間表型多樣性的主要部分。作為第三代遺傳標記,SNP 可幫助區(qū)分兩個個體遺傳物質的差異,有些 SNP 位點還會影響基因的功能,導致生物性狀改變甚至致病。因此,SNP 檢測是遺傳學研究等領域不可缺少的一部分。SNP 的檢測技術豐富多樣,有基于PCR的檢測手段、測序技術、基因芯片等,全式金生物推出基于 PCR 的 ARMS-PCR 法、TaqMan 探針法、高分辨率熔解曲線三種檢測方法,助力 SNP 檢測。
PerfectStart? IV Multiplex Probe ARMS qPCR SuperMix UDG
多重突變擴增阻滯系統 (ARMS) 熒光定量試劑盒(AQ734)
產品特點:
? 靈敏度高、特異性強:采用新升級的PerfectStart? IV 抗體封閉的熱啟動 Taq 酶,搭配適用于擴增阻滯突變系統最適的反應 Buffer,增強靈敏度與特異性。
? 操作簡單:2× 預混液,只需額外加入引物、探針及樣本,即可進行多重檢測。
? dUTP/UDG 防污染系統:有效防止 PCR 產物的交叉污染,數據準確。
應用場景:ARMS-qPCR 法,應用于腫瘤領域精準分子診斷,如腫瘤靶向用藥 EGFR 基因檢測。
實驗數據
PerfectStart? V Probe SNP Genotyping qPCR SuperMix UDG
探針法單核苷酸多態(tài)性 (SNP) 分型檢測試劑盒(AQ744)
產品特點:
? 特異性強:采用新升級的 PerfectStart? V Taq 熱啟動酶(經過基因改造的新一代 Taq DNA 聚合酶),在不同樣本上的分型檢測上具有高的特異性。
? 操作簡單:2× 預混液,只需額外加入引物、探針及樣本,即可進行多重檢測。
? dUTP/UDG 防污染系統:有效防止 PCR 產物的交叉污染,數據準確。
應用場景:TaqMan SNP 探針法,廣泛應用于大規(guī)模 SNP 檢測和基因表達分析等領域。
實驗數據
使用 AQ744 檢測人基因組 MTHFR 基因 C677T 位點,結果顯示,AQ744 可在 C/T 的不同分型中做到有效分型,為葉酸代謝的篩查和異常管理提供更高效精準的服務保障。
PerfectStart? V Multiplex Probe Melt qPCRMix UDG
超多重探針熔解曲線法檢測試劑盒 (AQ745)
產品特點:
? 均一性、特異性強:采用經特殊工藝處理的 PerfectStart? V 熱啟動 Taq 酶,針對超多重擴增后的熔曲峰值、均一性、特異性具有優(yōu)異效果。
? 操作簡單:2×預混液,只需額外加入引物、探針及樣本,即可進行多重檢測。
? dUTP/UDG 防污染系統:有效防止 PCR 產物的交叉污染,數據準確。
應用場景:高分辨熔解曲線法,應用于病原體檢測與鑒定 (如 HPV 不同分型診斷)、基因突變檢測、耐藥基因檢測等。
實驗數據
ALDH2多重探針熔曲法檢測
AQ745 產品可以實現對 ALDH2 的快速、有效且準確的分型定性檢測,為硝酸甘油治療心絞痛的及時治療、飲酒指導、相關癌癥的發(fā)生提供參考。
HPV 超多重探針熔曲法檢測
AQ745 可以通過熒光 PCR 熔解曲線法實現對 HPV 不同分型的超多重分型檢測,為 HPV 感染提供精準的輔助診斷。
數字 PCR
數字 PCR 即 Digital PCR (dPCR),它是一種核酸分子絕對定量技術。相較于 qPCR,數字 PCR 可讓你能夠直接計算出 DNA 分子的個數,是對起始樣品的絕對定量。其結果判定不依賴于擴增曲線的循環(huán)閾值 (Ct),不受擴增效率的影響,具有很好的準確度和重現性,在拷貝數變異、突變檢測、基因相對表達研究、二代測序結果驗證、miRNA 表達分析、單細胞基因表達分析等依靠 Ct 值不能很好分辨的領域應用廣泛。
PerfectStart? CHIPS dPCR SuperMix
芯片式數字 PCR (dPCR) 定量試劑盒 (AQ715)
適用于芯片式數字 PCR 的專用預混液,產品濃度為 2×,可滿足對 DNA 樣本進行擴增和絕對定量分析。該試劑盒使用簡單,只需額外加入引物、探針、模板,混勻后即可進行上機測試。本試劑盒具有較高的擴增性能和抗干擾能力,在腫瘤、各種病原體檢測中具有廣泛的適用性。此外,本試劑盒引入了 dUTP/UDG 系統,室溫下即可發(fā)揮作用,消除由 PCR 產物導致的交叉污染,保證結果準確性。
應用場景:適用于芯片法的數字 PCR
超低宿主核酸殘留
商業(yè)化分子酶多利用工程菌株 (如大腸桿菌) 重組表達,這使得分子酶常殘留一定的宿主基因組 DNA。同時,試劑制備環(huán)境、人源等因素也可能引入外源核酸,導致分子酶產品易被 DNA 污染。在病原體檢測時,污染的背景菌核酸可能與靶標核酸一同被檢出,影響 qPCR 檢測結果的可靠性。
PerfectStart? Taq Low DNA qPCR SuperMix UDG
低背景探針法熒光定量試劑盒 (AQ714)
產品特點:
? 宿主 DNA 殘留低:大腸、銅綠及金葡等16種常見病原菌 NTC 基因組 DNA 殘留無檢出。
? 擴增效率好:在 10~105 copies/μl 線性范圍內,擴增效率高達 100%。
? 穩(wěn)定性好,在反復凍融、預混液、常溫、37℃ 等條件下保存,均可穩(wěn)定擴增。
? dUTP/UDG 防污染系統:有效防止 PCR 產物的交叉污染,數據準確。
應用場景:適用于對宿主核酸殘留有高需求的項目,如病原菌檢測、生物制品檢測 (大腸桿菌相關)等。
實驗數據
污染質控
使用 AQ714 和 AQ712 產品進行大腸桿菌和人源 gDNA 體系 NTC 擴增,結果顯示,AQ714 無檢出,表明試劑中宿主 DNA 殘留較低。
適用范圍廣:
使用 AQ714 產品進行非洲豬瘟病毒、HPV16 分型、A 族鏈球菌、布魯氏菌擴增,結果顯示,AQ714 均可進行成功擴增,具有廣泛的模板適用性。
可凍干系列
全線 IVD 原料可提供可凍干配方,并支持多種凍干方式,包括八連排管凍干粉/球以及西林瓶凍干球
傳統 PCR 反應體系需要在低溫環(huán)境下保存,容易受到溫度波動和污染的影響,因此運輸成本高,使用過程中較為不便,限制了其在資源匱乏地區(qū)和現場快速檢測中的應用。PCR 凍干試劑穩(wěn)定性強、減少冷鏈依賴、提高操作的效率和準確性、降低成本,越來越受到大家的青睞。全式金全線 IVD 原料可提供可凍干配方,產品性能穩(wěn)定,助力 IVD 檢測。
產品特點:
? 種類豐富:全線 IVD 原料支持可凍干配方
? 支持多種凍干形式:八聯排凍干粉、八聯排凍干球、西林瓶凍干球
? 穩(wěn)定性好:45℃ 保存 45天,37℃ 保存 60天,產品性能不變
? 定制化:提供不同形式的定制凍干解決方案
PerfectStart? II Probe qPCR Lyo-SuperMix UDG
可凍干探針法 qPCR 試劑盒含 UDG II (AQ713)
應用場景:AQ712 可凍干版,適用于動物、植物、微生物 DNA 的探針法熒光定量 PCR 檢測,不同物種兼容性較好。
PerfectStart? III Fast Probe qPCR Lyo-SuperMix UDG
可凍干快速探針法 qPCR 試劑盒含 UDG III (AQ723)
應用場景:AQ722 可凍干版,適用于復雜樣本的檢測,目前已成功應用于 HPV、HBV 及動物病原體檢測等。
PerfectStart? IV Fast Probe qPCR Lyo-SuperMix UDG (AQ733)
探針法快速 qPCR 試劑盒含 UDG IV
應用場景:AQ732 可凍干版,針對拭子、血液樣本及含有其它雜質的樣本表現優(yōu)異,目前已成功應用于非洲豬瘟 (提取效果不佳的樣本)、HPV、肺癌、呼吸道細菌等檢測項目。
實驗數據
支持多種凍干形式
熱加速穩(wěn)定性好
使用在 37℃ 熱加速處理60天與0天的 AQ723 凍干微球水復溶后,以中、低濃度的 ASFV-gDNA 為模板進行4重基因擴增,結果顯示,37℃ 熱加速處理60天性能無變化,穩(wěn)定性好。
使用在 45℃ 保存不同天數 AQ713 凍干微球、干粉及凍干前液體進行基因擴增,結果顯示,45℃ 保存45天的產品性能無變化,性能穩(wěn)定。
全式金生物作為體外診斷原料供應商,始終致力于為客戶提供高品質產品。未來,我們也將繼續(xù)秉承“品質高于一切,精品服務客戶”的理念,堅持創(chuàng)新驅動,不斷提升產品的技術水平和市場競爭力,為體外診斷領域的發(fā)展貢獻更多的力量。