纖毛（也稱為鞭毛）是突出于真核細(xì)胞表面的一類細(xì)胞器，由纖毛膜、軸絲和基底部的基體組成，負(fù)責(zé)感受外界刺激（如光、聲、味、機(jī)械力和各類化學(xué)分子等）并將這些胞外信號傳導(dǎo)到胞內(nèi)，細(xì)胞對這些信息進(jìn)行應(yīng)答。研究表明定位于細(xì)胞膜的許多重要的信號分子包括G蛋白偶聯(lián)受體、離子通道以及其他類型的信號蛋白均特異性定位于纖毛膜，這是決定纖毛進(jìn)行信息傳遞的分子基礎(chǔ)。目前已知，纖毛信號分子通過與分子動力蛋白（motor proteins）驅(qū)動的鞭毛內(nèi)運輸體(intraflagellar transport（IFT）train）進(jìn)行偶聯(lián)，從而使其得以沿著纖毛微管軸突在細(xì)胞膜和纖毛膜之間動態(tài)運動。纖毛信號分子在纖毛膜和細(xì)胞膜之間循環(huán)運輸過程中，由八種保守蛋白（BBS1/2/4/5/7/8/9/18）組成的蛋白復(fù)合物BBSome在纖毛信號分子和鞭毛內(nèi)運輸體之間充當(dāng)連接體（adaptor），其功能就是把纖毛信號分子偶聯(lián)到鞭毛內(nèi)運輸體從而使其得以依賴于IFT在纖毛膜和細(xì)胞膜間進(jìn)行動態(tài)運送。因此，能夠?qū)е翨BSome組分缺失、組裝缺陷或纖毛定位異常的基因突變，均可引發(fā)纖毛信號分子在纖毛膜內(nèi)異常缺失或積累，從而導(dǎo)致巴德-畢德氏綜合癥（Bardet-Biedl syndrome，BBS）。亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子1 (LZTFL1) 可通過控制BBSome的含量來介導(dǎo)纖毛信號，是迄今為止發(fā)現(xiàn)的第17個與BBS有關(guān)的基因，LZTFL1基因突變會引發(fā)惡性腫瘤，繼而發(fā)展為癌癥。然而，迄今為止，這一過程背后的機(jī)制仍不明確。
2021年8月26日，PNAS在線發(fā)表了天津科技大學(xué)樊振川團(tuán)隊完成的題為Chlamydomonas LZTFL1 mediates phototaxis via controlling BBSome recruitment to the basal body and its reassembly at the ciliary tip的研究論文。全式金生物參與了該項研究，完成了RNA-seq等相關(guān)實驗環(huán)節(jié)，在該項研究中發(fā)揮了重要作用。該研究以萊茵衣藻為模式生物，利用遺傳、生化、細(xì)胞和單分子體內(nèi)活體成像及RNA測序分析等技術(shù)，闡明了LZTFL1通過調(diào)控BBSome向基底和纖毛尖端的重組來維持BBSome的纖毛動力學(xué)。
這項研究的主要發(fā)現(xiàn)歸納為：1） 低濃度的LZTFL1在纖毛基底聚集；2）LZTFL1在纖毛中擴(kuò)散，并在纖毛尖端與IFT分離的BBSome結(jié)合;3）LZTFL1促進(jìn)BBSome進(jìn)入纖毛；4）LZTFL1通過BBS3將BBSome送到基體；5）LZTFL1是穩(wěn)定IFT25/27所必需的；6）IFT25/27促進(jìn)了在纖毛尖端的BBSome重新組裝；7）LZTFL1是一種趨光性的正調(diào)節(jié)因子，當(dāng)纖毛中BBSome的異常積累或丟失，會破壞了纖毛BBSome的動力學(xué)，從而阻止了萊茵衣藻的趨光性。其中，在證明LZTFL1能穩(wěn)定IFT25/27的實驗中，發(fā)現(xiàn)天然LZTFL1和LZTFL1::YFP均存在于細(xì)胞質(zhì)中，這與LZTFL1從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核來抑制IFT25/27的轉(zhuǎn)錄的假設(shè)相反。因此，全式金生物利用RNA-seq分析，比較CC-125和LZTFL1miRNA細(xì)胞中mRNAs的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在LZTFL1miRNA細(xì)胞中，有234個基因表達(dá)出現(xiàn)上調(diào)，422個基因表達(dá)出現(xiàn)下調(diào)（圖A），22個IFT蛋白mRNA保持在WT水平（圖B）。接著通過qPCR分析了LZTFL1miRNA細(xì)胞中IFT25、IFT27、IFT22、IFT46、IFT70、IFT38、IFT57、IFT43和IFT139的mRNA水平，發(fā)現(xiàn)它們均處于WT水平，表明除了IFT25/27外，LZTFL1不影響其他IFT的mRNA含量。
CC-125和LZTFL1miRNA細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄水平差異分析
全式金核酸純化系列產(chǎn)品TransZol Up Plus RNA Kit(ER501)與二代測序系列產(chǎn)品 MagicPure? RNA Beads (EC501)、TransNGS? RNA-Seq Library Prep Kit for Illumina? (KP601)攜手助力該項研究，這也是全式金首次以合作者的身份登上PNAS雜志。
全式金迄今為止已獲授權(quán)發(fā)明專利18篇,我們始終相信科技創(chuàng)新是企業(yè)發(fā)展的原動力。未來我們將繼續(xù)秉持“品質(zhì)高于一切，精品服務(wù)科研”的理念，為客戶提供高品質(zhì)產(chǎn)品，助力科研，與客戶一起共同成長。
ER501: TransZol Up Plus RNA Kit
產(chǎn)品說明
本試劑盒適用于從細(xì)胞和組織中提取總RNA，用TransZol Up裂解樣品，加入氯仿后，溶液分為無色水相和粉紅色有機(jī)相，RNA在水相中；用硅膠膜離心柱特異吸附水相中的RNA，與其它總RNA提取方法相比，既具有TransZol Up裂解能力強(qiáng)、提取量高，應(yīng)用范圍廣的優(yōu)點，又具有離心柱提取RNA純度高的優(yōu)點。
特點
（1）應(yīng)用范圍廣：動物、植物組織、病毒和細(xì)菌等樣品。小量樣品(50-100 mg組織、5×106 細(xì)胞、200 μl血液)。大量樣品( ≥1 g 組織或≥107細(xì)胞），離心柱的最大吸附量為100 μg。
（2）裂解能力強(qiáng)：裂解充分、速度快，提取量高。
（3）提取速度快：一個小時內(nèi)即可完成。
（4）操作可視化：溶液呈粉紅色，便于分離水相。
（5）提取純度高：DNA和蛋白質(zhì)的污染低。
特點
操作簡便，適用于自動化工作站。
與競品的比較
分別使用TransGen和Company V產(chǎn)品對不同輸入量的人總RNA進(jìn)行純化，使用Qubit對純化前后的RNA進(jìn)行濃度測定，來確定RNA Beads的回收率。結(jié)果表明，不同RNA Beads的回收率無明顯差異。
與競品純化回收率比較
KP601: TransNGS? II Stranded RNA-Seq Library Prep Kit for Illumina?
特點
（1）高文庫轉(zhuǎn)化率。
（2）高數(shù)據(jù)質(zhì)量。
適用范圍
（1）全轉(zhuǎn)錄組測序。
（2）基因表達(dá)分析。
（3）單核苷酸變異分析。
（4）可變剪切檢測。
（5）融合基因檢測。
（6）非編碼RNA和RNA前體分析。
相關(guān)產(chǎn)品推薦
